Characterization of a soluble factor released by Trypanosoma brucei sp that induced arginase activity in macrophages

Résumé

Abstract

Extracellular trypanosomes can modulate the immune cell function through parasite soluble factor (PSF) that induce arginase activity. In this report, we aimed to identify the soluble factor that induce arginase in macrophages. Macrophage arginase was induced by Trypanosoma brucei gambiense and by their PSF in vitro. We also identified a 120-130 kDa protein as the main arginase-inducing factor in the PSF. This factor consists in a dimer of 60-65 KDa proteins, which do not stimulate the induction of arginase individually. The identification of a such marker of immune dysregulation observed during Human African trypanosomiasis may help in the amelioration of diagnosis.

Keywords: PSF, arginase induction, macrophages, Trypanosome brucei sp, in vitro.

RESUME

Les trypanosomes extracellulaires peuvent moduler la fonction des cellules immunitaires en sécrétant des facteurs solubles parasitaire (PSF) qui induisent l'activité de l'arginase. L’identification de la fraction du PSF qui induit l’arginase macrophagique est nécessaire dans l’objectif de la mise au point d'un diagnostic précoce de la maladie. Les trypanosomes ont été obtenus à partir de souris infectées, la purification des parasites est faite sur une colonne de DEAE-cellulose. Les parasites ont été cultivés dans un milieu minimum à 37°C contenant 5% de CO₂ pendant 2 heures. Le surnageant contenant le PSF est utilisé pour activer l'arginase macrophagique. L’analyse du PSF sur la colonne de chromatographie d'affinité et l'électrophorèse suivie de Western blot a montré une bande d'environ 120 kDa qui se divise en deux après le traitement pour donner une bande de 60 KDa. Cette première bande très labile, serait la molécule inductrice de l’arginase qui peut être utilisée comme marqueur de cette maladie. La grande difficulté de la trypanosomose est liée au fait que le diagnostic précoce reste incertain et de nombreux patients échappent aux suivis. Cette étude pourrait permettre la mise au point d’une méthode de diagnostic de la maladie du sommeil. Elle permettra de trouver un moyen simple et fiable de diagnostic précoce de la maladie. Cette étude se poursuivra avec l'utilisation de composants purifiés ou non de PSF pour la campagne de prospection sérologiques dans les zones endémiques.

Mots clées: PSF, induction arginase, macrophages, Trypanosome brucei sp, in vitro.